| Sumario: | Factores intercambiadores de GDP/GTP (GEFs), y sus proteinas G asociadasson piezas fundamentales en la maquinaria que transduce información desde el medioextracelular hacia respuestas específicas intracelulares. Entre ellas, la cascada de MAPKs, representa una via efectora ampliamente representada. De forma análoga a la activación de la vía ERK-1/2 dependiente de Ras,miembros de la familia Rho de proteínas G son capaces de activar la cascada de JNK,al ser cargado GTP, por sus correspondientes GEFs. En la búsqueda de nuevos reguladores de la actividad de JNK, hemosidentificado a EPAC como un fuerte activador de JNK-1, EPAC (Exchange Protein Activated by CAMP) es un miembro de la creciente familia de GEFs que intercambiannucleótidos sobre la subfamilia Rap de proteinas G de Ia familia Ras. En la presente tesis, reportamos que mientras EPAC activa a JNK varias veces,una mutante constitutivamente activa de Rap1b (G12V), no es capaz, sugiriendo que Rap-GTP no es suficiente para transducir señales dependientes de EPAC hacia laactivación de JNK. Es más, la señalización de EPAC a JNK no es bloqueada por lainactivación de Rap endógena, sugiriendo que la activación de Rap no es necesariapara esta respuesta. Consistentemente con estas observaciones, la utilización de mutantes quetienen delecionados dominios proteicos, muestran que el dominio catalitico GEF no esnecesario para la activación de JNK mediada por EPAC. Estos estudios identificaronuna región que se superpone con el dominio REM de EPAC, como crítico para laactivación de JNK. De hecho, el dominio REM aislado es suficiente para activar JNK. Mediante a utilización de mutantes dominantes negativas de la cascada de JNK,hemos identificado a la familia Rho de pequeñas proteínas G como blanco de EPAC, enla activación de JNK. Incluso, una actividad intercambiadora de nucleótido para Rac y Cdc42, se encuentra presente en inmunoprecipitados de EPAC, sugiriendo la formaciónde un complejo entre EPAC y un putativo GEF para estas proteinas G. Concluimos que EPAC señaliza a la cascada de JNK a través de un nuevomecanismo que no involucra su canónica acción catalitica, ej: intercambio de GDP/GTPsobre proteínas Rap. Esto representa no solo una nueva vía de activación de JNK, sinoun mecanismo aún no descripto de señalización río abajo de EPAC.
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