Estudio de microambiente hipóxico y del metabolismo lipídico del carcinoma renal de células claras (crcc)
El cáncer de riñón representa el 2,5% de todos los cánceres, con una incidencia mundial de 300.000 casos, los cuales conducen a 111.000 óbitos anuales. El carcinoma renal de células claras (CRCC) es el subtipo más común de carcinoma de células renales (CCR), denominado de esta manera por el aspec...
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| Otros Autores: | |
| Formato: | Tesis doctoral |
| Lenguaje: | Español |
| Publicado: |
Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura
2022
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| Materias: | |
| Acceso en línea: | http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/50555 |
| Aporte de: |
| Sumario: | El cáncer de riñón representa el 2,5% de todos los cánceres, con una incidencia mundial de
300.000 casos, los cuales conducen a 111.000 óbitos anuales. El carcinoma renal de células
claras (CRCC) es el subtipo más común de carcinoma de células renales (CCR), denominado de
esta manera por el aspecto claro del citoplasma celular, consecuencia del alto contenido lipídico.
Aunque en la actualidad se están diseñando y aplicando nuevos tratamientos terapéuticos
basados en la combinación de inhibidores de tirosina quinasa e inmunoterapias, el CRCC se
presenta como una entidad oncológica compleja de difícil predicción.
Existe, por lo tanto, un gran interés de conocer las bases moleculares de la biología tumoral del
CRCC, lo cual podría contribuir a una mejor comprensión del comportamiento biológico agresivo
de este cáncer e identificar biomarcadores tempranos de la enfermedad, así como también
blancos terapéuticos que frenen la proliferación de este tipo de células malignas.
El objetivo general de esta tesis doctoral consistió en estudiar las moléculas involucradas en el
microambiente hipóxico del CRCC y profundizar en los roles de la estearoil CoA desaturasa de
tipo 1 (SCD-1) y de la proteína de resistencia a múltiples fármacos de tipo 4 (MRP4) en la
regulación de la proliferación tumoral, con el objeto de validarlos como posibles dianas
terapéuticas o biomarcadores diagnósticos y/o predictivos de esta afección maligna.
SCD-1 cataliza la introducción de un doble enlace en varios acil-CoA grasos saturados,
principalmente estearoil-CoA, para sintetizar ácido oleico (18:1n-9). Este producto enzimático
participa en la proliferación, señalización e invasividad de las células tumorales. Mientras que
MRP4, expresado débilmente en la membrana apical de los túbulos renales contorneados
proximales, se encarga de bombear una serie de compuestos exógenos y endógenos del espacio
intracelular al extracelular. Entre los componentes que extruye MRP4 se encuentran diversos
fármacos antitumorales y el AMPc (importante segundo mensajero implicado en procesos de
proliferación celular).
Es así, que, en este trabajo, se presenta información novedosa respecto a la biología tumoral del
CRCC, en la cual se aborda el estudio del microambiente hipóxico y su influencia sobre la
expresión/actividad de un conjunto de proteínas implicadas en los procesos de proliferación,
supervivencia y apoptosis de células tumorales. Por lo tanto, se han estudiado a través de
estudios multiparamétricos: los factores inducibles por hipoxia de tipo 1 y 2 (HIF-1α y HIF-2α), eritropoyetina y su receptor (EPO y EPO-R), el factor de crecimiento endotelial vascular y su
receptor (VEGF y VEGFR-2), SCD-1 y MRP4.
La metodología de trabajo incluyó diversas técnicas, entre ellas: cultivos celulares, biología
molecular, Western blot, inmunohistoquímica e inmunocitoquímica, ensayos de viabilidad y
proliferación celular, radioinmunoensayos, espectrometría de masas, citometría de flujo y
microscopias (óptica, fluorescente directa y confocal).
Los resultados obtenidos revelaron que HIF-1α, EPO, EPO-R, VEGF, VEGFR-2, SCD-1 y MRP4
fueron sobreexpresados en la mayoría de las muestras tumorales de CRCC obtenidas por
nefrectomía. Las relaciones directamente proporcionales entre los pares HIF-1α/SCD-1 y SCD-
1/Ki-67 sugirieron un vínculo entre estas moléculas, implicadas en la progresión tumoral en
primeras etapas del CRCC.
Los análisis lipidómicos de los tumores y las líneas celulares de CRCC, demostraron que el 18:1n-
9 fue uno de los principales ácidos grasos comprometidos y particularmente el más abundante
en la fracción de lípidos neutros en el core tumoral. Utilizando un modelo in vitro de hipoxia
química sobre la línea celular CAKI-2 (línea de CRCC), se halló una sobreexpresión de SCD-1. El
aumento en la expresión de SCD-1 causó un incremento en los niveles de 18:1n-9, que a su vez,
se acumuló en la fracción lipídica neutra. La inhibición farmacológica de SCD-1 bloqueó la
síntesis de 18:1n-9 y comprometió la proliferación celular. Mientras que la adición de 18:1n-9
exógeno a las células revirtió los efectos de la inhibición enzimática sobre la proliferación celular.
Por otra parte, también se encontró una sobreexpresion de MRP4 al utilizar el modelo in vitro
de hipoxia química sobre la línea celular CAKI-2. El bloqueo farmacológico de MRP4 en células
CAKI-2, generó un desequilibrio en el metabolismo del AMPc, induciendo la detención del ciclo
celular, cambios en la composición de lípidos, aumento de lipid droplets (LD) citoplasmáticos y
finalmente la apoptosis.
Estos datos revelan por primera vez que, tanto SCD-1, enzima clave de los niveles de ácido
oleico, como MRP4, moduladora de las concentraciones intracelulares de AMPc, son proteínas
cruciales de control de dos procesos bioquímicos coexistentes vinculados a la proliferación de
células tumorales y sensibles a la hipoxia. En conclusión, durante el desarrollo de esta tesis se comprobó que las dos proteínas estudiadas,
SCD-1 y MRP4 presentaron firmes evidencias experimentales para ser utilizadas como posibles
biomarcadores y/o blancos terapéuticos para CRCC. |
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