Efecto antifúngico de nanopartículas de plata obtenidas a partir de Aspergillus terreus, sobre levaduras del género Cándida

La nanotecnología es una ciencia relativamente nueva, que se encuentra en creciente desarrollo debido a su amplia gama de aplicaciones en diferentes áreas. En las últimas décadas, la nanotecnología se ha centrado en el estudio e investigación de las nanopartículas metálicas, principalmente las na...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Noblega, Luciana María
Otros Autores: Romero, Cintia Mariana
Formato: Tesis de maestría
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina 2024
Materias:
Acceso en línea:http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/56085
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Descripción
Sumario:La nanotecnología es una ciencia relativamente nueva, que se encuentra en creciente desarrollo debido a su amplia gama de aplicaciones en diferentes áreas. En las últimas décadas, la nanotecnología se ha centrado en el estudio e investigación de las nanopartículas metálicas, principalmente las nanopartículas de plata (AgNPS). La biosíntesis de las mismas, ha recibido gran atención debido a su extensa variedad de aplicaciones médicas, entre la que se destaca su potencial efecto antimicrobiano. Últimamente se observó un aumento de microorganismos resistentes a los antimicrobianos de uso convencional. Así también, las infecciones fúngicas oportunistas se incrementaron dramáticamente. Aunque, los principales agentes causales siguen siendo Candida y Aspergillus, el espectro de patógenos fúngicos ha cambiado y se han diversificado. Los azoles y polienos han sido el pilar fundamental en la terapia antimicótica durante años, sin embargo, la resistencia a fluconazol manifestada por diferentes cepas patógenas, y la elevada toxicidad de la anfotericina B, impulsaron investigaciones de nuevas moléculas con potencial antifúngico. En el presente estudio, se biosintetizaron AgNPS empleando, como agente reductor de los iones Ag+ , los metabolitos presentes en el sobrenadante de un cultivo de Aspergillus terreus. La biorreducción de las AgNPS obtenidas se monitorearon por espectroscopía ultravioleta-visible,mostrando una absorbancia máxima a 440 nm. También se caracterizaron por microscopía electrónica de barrido, detectando un tamaño promedio de 55 nm y caracteres morfológicos de nanopartículas esféricas. Finalmente, los estudios de espectroscopía infrarroja con transformada de Fourier permitieron corroborar la presencia de proteínas como agentes estabilizadores que rodean las AgNPS. El potencial antifúngico de las AgNPS se evaluó por el método de difusión en agar (con modificaciones) y el método de microdilución en caldo (con modficaciones). Las cepas ensayadas correspondieron a aislamientos clínicos y cepas ATCC. Las cepas evaluadas mediante el método de difusión en agar fueron: Candida albicans, Candida glabrata, y Candida tropicalis, (una de cada una) y dos cepas ATCC : Candida parapsilosis ATCC 22019 y Candida krusei ATCC 6258. Los halos de inhibición obtenidos fueron 15 mm en el caso de C. albicans; 13 mm en C.parapsilosis ; 17 mm en C. krusei. En C. glabrata y C.tropicalis no se registraron halos de inhibición. En cuanto al método de microdilución en caldo, se ejecutó siguiendo los lineamientos del European Committee on Antimirobial Susceptibility Testing (EUCAST) en su documento EDEF 7.3.1 con modificaciones. Las cepas ensayadas fueron: 3 cepas de C. albicans, 3 cepas de C. glabrata, 3 cepas de C. parapsilosis, 3 cepas de C. tropicalis y 3 cepas de C. krusei. También se ensayaron 1 cepa C. krusei ATCC 6258 y C. parapsilosis ATCC 22019. Los resultados de concentración inhibitoria mínima (CIM) obtenidos fueron de 64 µg/mL de AgNPS en todas las cepas ensayadas de C. albicans. C. glabrata, C.parapsilosis, C. tropicalis y para la C.parapsilosis ATCC 22019, mientras que la CIM obtenida frente a C. krusei fue (aislamientos clínicos y ATCC ) de 32 µg/mL En el presente estudio también se realizaron estudios de citotoxicidad en donde las AgNPS mostraron un efecto citotóxico dependiente de la dosis en células hepáticas normales.