Desarrollo de vectores adenovirales genéticamente optimizados como candidatos vacunales frente al Virus de la Fiebre Aftosa

Despite the success of adenovirus vectors (Ad5) as vaccine candidates for several Foot-and-mouth Disease (FMDV) strains, reproducible and trustworthy results have been difficult to achieve for the epidemiologically relevant O1/Campos strain. In this work, we hypothesized that enhanced expression of...

Descripción completa

Guardado en:
Detalles Bibliográficos
Autor principal: Ziraldo, Micaela
Otros Autores: Mbayed, Viviana
Formato: Tesis doctoral acceptedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica 2022
Materias:
Virus de la fiebre aftosa
Adenovirus humano tipo 5 no replicativo
Proteína VP2 mutante
Partículas tipo virus
Anticuerpos neutralizantes
Respuesta inmune
Foot-and-mouth disease virus
Replication-defective human adenovirus type 5
Mutated VP2 capsid protein
Virus-like particles O1/Campos
Neutralizing antibodies
Immune response
Ciencias de la vida
Acceso en línea:http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=posgraafa&cl=CL1&d=HWA_6706
https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/collect/posgraafa/index/assoc/HWA_6706.dir/6706.PDF
Aporte de:
Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA) de Universidad de Buenos Aires
id I28-R145-HWA_6706
record_format dspace
institution Universidad de Buenos Aires
institution_str I-28
repository_str R-145
collection Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA)
language Español
orig_language_str_mv spa
topic Virus de la fiebre aftosa
Adenovirus humano tipo 5 no replicativo
Proteína VP2 mutante
Partículas tipo virus
Anticuerpos neutralizantes
Respuesta inmune
Foot-and-mouth disease virus
Replication-defective human adenovirus type 5
Mutated VP2 capsid protein
Virus-like particles O1/Campos
Neutralizing antibodies
Immune response
Ciencias de la vida
spellingShingle Virus de la fiebre aftosa
Adenovirus humano tipo 5 no replicativo
Proteína VP2 mutante
Partículas tipo virus
Anticuerpos neutralizantes
Respuesta inmune
Foot-and-mouth disease virus
Replication-defective human adenovirus type 5
Mutated VP2 capsid protein
Virus-like particles O1/Campos
Neutralizing antibodies
Immune response
Ciencias de la vida
Ziraldo, Micaela
Desarrollo de vectores adenovirales genéticamente optimizados como candidatos vacunales frente al Virus de la Fiebre Aftosa
topic_facet Virus de la fiebre aftosa
Adenovirus humano tipo 5 no replicativo
Proteína VP2 mutante
Partículas tipo virus
Anticuerpos neutralizantes
Respuesta inmune
Foot-and-mouth disease virus
Replication-defective human adenovirus type 5
Mutated VP2 capsid protein
Virus-like particles O1/Campos
Neutralizing antibodies
Immune response
Ciencias de la vida
description Despite the success of adenovirus vectors (Ad5) as vaccine candidates for several Foot-and-mouth Disease (FMDV) strains, reproducible and trustworthy results have been difficult to achieve for the epidemiologically relevant O1/Campos strain. In this work, we hypothesized that enhanced expression of FMDV capsid proteins and their self-association into virus-like particles (VLP) would improve the efficacy of an Ad5-O1/C vaccine. We generated the Ad5[PVP2]INV which contains an optimized cassette inserted in a leftward orientation relative to the Ad5 genome and the substitutions S93F/Y98F within VP2, predicted to stabilize FMDV particles. Cells infected with Ad5[PVP2]INV showed an ?14-fold increase of FMDV protein expression than the unmodified Ad5[P]. FMDV-like particles expressed by Ad5[PVP2]INV, which displayed similar thermostability to naturally-generated empty particles, were observed by electron microscopy. Infection of mouse dendritic cells with Ad5[PVP2]INV induced a higher upregulation of CD80 and CD86 than Ad5[P], in a dose-dependent kinetics. Inoculation of Ad5[PVP2]INV promoted higher total and neutralizing O1/C antibodies titers, as compared to Ad5[P], and protected 94 % of mice from homologous challenge. In conclusion, increased protein expression and stabilization of in situ generated VLP improved the performance of an Ad5-O1/Campos vaccine in a well-supported model, providing optimistic expectations to be tested in target animals.
author2 Mbayed, Viviana
author_facet Mbayed, Viviana
Ziraldo, Micaela
format Tesis doctoral
Tesis doctoral
acceptedVersion
author Ziraldo, Micaela
author_sort Ziraldo, Micaela
title Desarrollo de vectores adenovirales genéticamente optimizados como candidatos vacunales frente al Virus de la Fiebre Aftosa
title_short Desarrollo de vectores adenovirales genéticamente optimizados como candidatos vacunales frente al Virus de la Fiebre Aftosa
title_full Desarrollo de vectores adenovirales genéticamente optimizados como candidatos vacunales frente al Virus de la Fiebre Aftosa
title_fullStr Desarrollo de vectores adenovirales genéticamente optimizados como candidatos vacunales frente al Virus de la Fiebre Aftosa
title_full_unstemmed Desarrollo de vectores adenovirales genéticamente optimizados como candidatos vacunales frente al Virus de la Fiebre Aftosa
title_sort desarrollo de vectores adenovirales genéticamente optimizados como candidatos vacunales frente al virus de la fiebre aftosa
publisher Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica
publishDate 2022
url http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=posgraafa&cl=CL1&d=HWA_6706
https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/collect/posgraafa/index/assoc/HWA_6706.dir/6706.PDF
work_keys_str_mv AT ziraldomicaela desarrollodevectoresadenoviralesgeneticamenteoptimizadoscomocandidatosvacunalesfrentealvirusdelafiebreaftosa
_version_ 1840330173714530304
spelling I28-R145-HWA_67062025-06-25 Despite the success of adenovirus vectors (Ad5) as vaccine candidates for several Foot-and-mouth Disease (FMDV) strains, reproducible and trustworthy results have been difficult to achieve for the epidemiologically relevant O1/Campos strain. In this work, we hypothesized that enhanced expression of FMDV capsid proteins and their self-association into virus-like particles (VLP) would improve the efficacy of an Ad5-O1/C vaccine. We generated the Ad5[PVP2]INV which contains an optimized cassette inserted in a leftward orientation relative to the Ad5 genome and the substitutions S93F/Y98F within VP2, predicted to stabilize FMDV particles. Cells infected with Ad5[PVP2]INV showed an ?14-fold increase of FMDV protein expression than the unmodified Ad5[P]. FMDV-like particles expressed by Ad5[PVP2]INV, which displayed similar thermostability to naturally-generated empty particles, were observed by electron microscopy. Infection of mouse dendritic cells with Ad5[PVP2]INV induced a higher upregulation of CD80 and CD86 than Ad5[P], in a dose-dependent kinetics. Inoculation of Ad5[PVP2]INV promoted higher total and neutralizing O1/C antibodies titers, as compared to Ad5[P], and protected 94 % of mice from homologous challenge. In conclusion, increased protein expression and stabilization of in situ generated VLP improved the performance of an Ad5-O1/Campos vaccine in a well-supported model, providing optimistic expectations to be tested in target animals. Fil: Ziraldo, Micaela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, Argentina Mbayed, Viviana D'Antuono, Alejandra Ziraldo, Micaela 2022-02-24 Candidatos vacunales basados en adenovirus humano tipo 5 (Ad5) frente a la cepa O1/Campos del Virus de la Fiebre Aftosa (VFA) mostraron resultados de eficacia poco consistentes. El objetivo del trabajo es desarrollar Ad5 que favorezcan la producción in situ de proteínas capsidales del VFA y su ensamblado en partículas tipo virus (PTV), y que protejan contra el VFA. Para ello, generamos el Ad5[PVP2]INV que contiene la unidad de expresión optimizada, insertada en sentido inverso respecto al genoma adenoviral, y las sustituciones estabilizantes S93F/Y98F en la proteína capsidal VP2. Células infectadas con Ad5[PVP2]INV acumularon niveles 14 veces mayores de proteínas capsidales, respecto al Ad5[P] no optimizado. PTV expresadas a través de Ad5[PVP2]INV, que presentan una termoestabilidad similar a las cápsides vacías naturales, se observaron mediante microscopía electrónica. Células dendríticas de ratón infectadas con Ad5[PVP2]INV expresaron mayores niveles de CD80 y CD86, de forma dependiente de la dosis. El 95 % de los ratones inoculados con Ad5[PVP2]INV resultaron protegidos frente al desafío homólogo, exhibiendo títulos de anticuerpos totales y neutralizantes superiores respecto al Ad5[P]. El incremento de las proteínas capsidales y la formación in situ de PTV mejoró el desempeño del Ad5-O1/Campos, alentando su evaluación en especies susceptibles. application/pdf Sanchez Alberti, Andres Mundo, Silvia De los Santos, Teresa Virus de la fiebre aftosa Adenovirus humano tipo 5 no replicativo Proteína VP2 mutante Partículas tipo virus Anticuerpos neutralizantes Respuesta inmune Foot-and-mouth disease virus Replication-defective human adenovirus type 5 Mutated VP2 capsid protein Virus-like particles O1/Campos Neutralizing antibodies Immune response spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica info:eu-repo/semantics/openAccess http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/ Ciencias de la vida Doctora de la Universidad de Buenos Aires en Ciencias Biológicas Desarrollo de vectores adenovirales genéticamente optimizados como candidatos vacunales frente al Virus de la Fiebre Aftosa info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/acceptedVersion http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=posgraafa&cl=CL1&d=HWA_6706 https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/collect/posgraafa/index/assoc/HWA_6706.dir/6706.PDF

Ejemplares similares