Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli

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La glucógeno sintetasa (GS) de Escherichia coli es una glicosiltransferasa que transfiereglucosas desde la ADP-glucosa (ADP-Glc) hacia el extremo no reductor del glucógeno,reteniendo la configuración anomérica. En el presente trabajo, se identificó mediante técnicasde modificación química y mutagéne...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal:	Yep Rodríguez, Alejandra
Otros Autores:	Preiss, Jack
Formato:	Tesis doctoral publishedVersion
Lenguaje:	Español
Publicado:	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 2004
Materias:	GLUCOGENO GLUCOGENO SINTETASA GLGA GLICOSILTRANSFERASA ALMIDON GT-B GLYCOGEN GLYCOGEN SYNTHASE GLYCOSYLTRANSFERASE STARCH
Acceso en línea:	https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3769_YepRodriguez https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3769_YepRodriguez_oai
Aporte de:	Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA) de Universidad de Buenos Aires

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spelling	I28-R145-tesis_n3769_YepRodriguez_oai2024-09-02 Preiss, Jack Yep Rodríguez, Alejandra 2004 La glucógeno sintetasa (GS) de Escherichia coli es una glicosiltransferasa que transfiereglucosas desde la ADP-glucosa (ADP-Glc) hacia el extremo no reductor del glucógeno,reteniendo la configuración anomérica. En el presente trabajo, se identificó mediante técnicasde modificación química y mutagénesis sitio-dirigida una zona conservada entre las GSbacterianas y almidón sintetasas involucrada en catálisis y unión de sustratos. Posteriormente,se generó un modelo de homología de la GS de E. coli basándose en la estructura deotras tres glicosiltransferasas con un mismo tipo de fold GT-B. La comparación entre las estructurasde las glicosiltransferasas cristalizadas y el modelo de homología llevó a la identificaciónde un grupo de residuos conservados compartiendo una misma topología. Las mutaciones E377A, D137A, R3OOA,K305A y H161A disminuyeron la actividad específica 10000, 8100, 2600, 1200 y 710 veces, respectivamente. Ninguna de las mutaciones aumentóel S0.5; para el glucógeno, y sólo H161A y R300A mostraron S0.5; aumentados para la ADP-Glc en ll y 8 veces, respectivamente. Estos residuos resultaron esenciales para lacatálisis enzimática, validando el modelo que muestra una importante similitud en el sitioactivo de GS de E. coli y otras glicosiltransferasas con un fold GT-B cristalizadas hasta lafecha. Asimismo, se identificaron con técnicas de modelado y se estudiaron otros residuosconservados que tienen una participación potencial en la unión de la ADP-Glc y elglucógeno. Esta es la primera vez que se estudia detalladamente el sitio activo de una GSbacteriana. Fil: Yep Rodríguez, Alejandra. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. application/pdf https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3769_YepRodriguez spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar GLUCOGENO GLUCOGENO SINTETASA GLGA GLICOSILTRANSFERASA ALMIDON GT-B GLYCOGEN GLYCOGEN SYNTHASE GLGA GLYCOSYLTRANSFERASE STARCH GT-B Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli Structure-function relationships in the Escherichia coli glycogen synthase info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/publishedVersion https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3769_YepRodriguez_oai
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Relaciones entre estructura y función en la glucógeno sintetasa de Escherichia coli

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