Papel del heparan sulfato en el proceso de descondensación de la cromatina del espermatozoide humano

Nuestro laboratorio estudia la descondensación nuclear del espermatozoide humano in vitro, intentando ahondar en la comprensión de las etapas del proceso y las moléculas involucradas en el mismo. La descondensación requiere la reducción de puentes disulfuro en las protaminas y la remoción de las mis...

Descripción completa

Guardado en:
Detalles Bibliográficos
Autor principal: Romanato, Marina
Otros Autores: Calvo, Juan Carlos
Formato: Tesis doctoral publishedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 2009
Materias:
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4396_Romanato
https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n4396_Romanato_oai
Aporte de:
id I28-R145-tesis_n4396_Romanato_oai
record_format dspace
institution Universidad de Buenos Aires
institution_str I-28
repository_str R-145
collection Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA)
language Español
orig_language_str_mv spa
topic DESCONDENSACION DEL NUCLEO ESPERMATICO
HEPARAN SULFATO
PROTAMINA
GLICOSAMINOGLICANO
HEPARINA
ESPERMATOZOIDE
OVOCITO
NUCLEAR SPERM DECONDENSATION
HEPARAN SULFATE
HEPARIN
PROTAMINE
GLYCOSAMINOGLYCANS
SPERMATOZOA
OOCYTE
spellingShingle DESCONDENSACION DEL NUCLEO ESPERMATICO
HEPARAN SULFATO
PROTAMINA
GLICOSAMINOGLICANO
HEPARINA
ESPERMATOZOIDE
OVOCITO
NUCLEAR SPERM DECONDENSATION
HEPARAN SULFATE
HEPARIN
PROTAMINE
GLYCOSAMINOGLYCANS
SPERMATOZOA
OOCYTE
Romanato, Marina
Papel del heparan sulfato en el proceso de descondensación de la cromatina del espermatozoide humano
topic_facet DESCONDENSACION DEL NUCLEO ESPERMATICO
HEPARAN SULFATO
PROTAMINA
GLICOSAMINOGLICANO
HEPARINA
ESPERMATOZOIDE
OVOCITO
NUCLEAR SPERM DECONDENSATION
HEPARAN SULFATE
HEPARIN
PROTAMINE
GLYCOSAMINOGLYCANS
SPERMATOZOA
OOCYTE
description Nuestro laboratorio estudia la descondensación nuclear del espermatozoide humano in vitro, intentando ahondar en la comprensión de las etapas del proceso y las moléculas involucradas en el mismo. La descondensación requiere la reducción de puentes disulfuro en las protaminas y la remoción de las mismas para ser reemplazadas por histonas ovocitarias. Los espermatozoides humanos pueden descondensarse in vitro con heparina y glutatión. Observamos en estudios previos que el heparán sulfato (HS), análogo estructural de la heparina, pero no así otros glicosaminoglicanos, presenta actividad descondensante in vitro similar a la heparina y propusimos que HS actuaría in vivo como aceptor de protaminas. El presente trabajo tuvo como objetivos (1) acercarse a las condiciones in vivo analizando el comportamiento de núcleos aislados frente a la descondensación con heparina y glutatión in vitro y (2) demostrar que HS está presente en el ovocito y podría funcionar como agente descondensante. Se utilizaron espermatozoides de donantes normospérmicos (OMS) y ovocitos de ratón. Los núcleos espermáticos aislados descondensaron con glutatión y heparán sulfato o heparina pero no con otros glicosaminoglicanos. El análisis por microscopía confocal reveló localización de HS en el citoplasma y el espacio perivitelino del ovocito. La utilización de enzimas específicas indicó que la capacidad descondensante del ovocito podía atribuirse a la presencia de HS. Estas son las primeras evidencias de la presencia de HS en el ovocito y de su posible rol como aceptor de protaminas durante la descondensación del espermatozoide humano in vivo.
author2 Calvo, Juan Carlos
author_facet Calvo, Juan Carlos
Romanato, Marina
format Tesis doctoral
Tesis doctoral
publishedVersion
author Romanato, Marina
author_sort Romanato, Marina
title Papel del heparan sulfato en el proceso de descondensación de la cromatina del espermatozoide humano
title_short Papel del heparan sulfato en el proceso de descondensación de la cromatina del espermatozoide humano
title_full Papel del heparan sulfato en el proceso de descondensación de la cromatina del espermatozoide humano
title_fullStr Papel del heparan sulfato en el proceso de descondensación de la cromatina del espermatozoide humano
title_full_unstemmed Papel del heparan sulfato en el proceso de descondensación de la cromatina del espermatozoide humano
title_sort papel del heparan sulfato en el proceso de descondensación de la cromatina del espermatozoide humano
publisher Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
publishDate 2009
url https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4396_Romanato
https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n4396_Romanato_oai
work_keys_str_mv AT romanatomarina papeldelheparansulfatoenelprocesodedescondensaciondelacromatinadelespermatozoidehumano
AT romanatomarina roleofheparansulfateintheprocessofhumanspermchromatindecondensation
_version_ 1824355189203664896
spelling I28-R145-tesis_n4396_Romanato_oai2024-09-02 Calvo, Juan Carlos Romanato, Marina 2009 Nuestro laboratorio estudia la descondensación nuclear del espermatozoide humano in vitro, intentando ahondar en la comprensión de las etapas del proceso y las moléculas involucradas en el mismo. La descondensación requiere la reducción de puentes disulfuro en las protaminas y la remoción de las mismas para ser reemplazadas por histonas ovocitarias. Los espermatozoides humanos pueden descondensarse in vitro con heparina y glutatión. Observamos en estudios previos que el heparán sulfato (HS), análogo estructural de la heparina, pero no así otros glicosaminoglicanos, presenta actividad descondensante in vitro similar a la heparina y propusimos que HS actuaría in vivo como aceptor de protaminas. El presente trabajo tuvo como objetivos (1) acercarse a las condiciones in vivo analizando el comportamiento de núcleos aislados frente a la descondensación con heparina y glutatión in vitro y (2) demostrar que HS está presente en el ovocito y podría funcionar como agente descondensante. Se utilizaron espermatozoides de donantes normospérmicos (OMS) y ovocitos de ratón. Los núcleos espermáticos aislados descondensaron con glutatión y heparán sulfato o heparina pero no con otros glicosaminoglicanos. El análisis por microscopía confocal reveló localización de HS en el citoplasma y el espacio perivitelino del ovocito. La utilización de enzimas específicas indicó que la capacidad descondensante del ovocito podía atribuirse a la presencia de HS. Estas son las primeras evidencias de la presencia de HS en el ovocito y de su posible rol como aceptor de protaminas durante la descondensación del espermatozoide humano in vivo. Our laboratory studies human sperm nuclear decondensation in vitro, in an attempt to further understand the different stages of the process and the molecules involved in it. Decondensation requires protamine disulfide bond reduction followed by protamine removal to allow replacement by oocyte histones. Human spermatozoa can be decondensed in vitro with heparin and glutathione. In previous studies we showed that heparan sulfate (HS), structural analogue of heparin, but not other glycosaminoglycans, has a similar decondensing ability in vitro and we proposed that HS could function as protamine acceptor in vivo. The aims of the present study were (1) to approach in vivo conditions analyzing the decondensation of isolated sperm nuclei in vitro with heparin/HS and glutathione and (2) to demonstrate that HS is present in the oocyte and could thus function as decondensing agent in vivo. Spermatozoa obtained from normozoospermic (OMS) donors and mouse oocytes were used. Isolated sperm nuclei decondensed in vitro with HS or heparin but not with other glycosaminoglycans. Confocal microscopy revealed that HS is present in the ooplasm and perivitelline space of the oocyte. The use of specific glycosidases showed that oocyte decondensing capacity in vitro could be attributed to HS. These results provide the first evidence on the presence of HS in the oocyte and its possible role as sperm protamine acceptor during human sperm decondensation in vivo. Fil: Romanato, Marina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. application/pdf https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4396_Romanato spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar DESCONDENSACION DEL NUCLEO ESPERMATICO HEPARAN SULFATO PROTAMINA GLICOSAMINOGLICANO HEPARINA ESPERMATOZOIDE OVOCITO NUCLEAR SPERM DECONDENSATION HEPARAN SULFATE HEPARIN PROTAMINE GLYCOSAMINOGLYCANS SPERMATOZOA OOCYTE Papel del heparan sulfato en el proceso de descondensación de la cromatina del espermatozoide humano Role of heparan sulfate in the process of human sperm chromatin decondensation info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/publishedVersion https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n4396_Romanato_oai